« Spectroscopie ultraviolet-visible » : différence entre les versions — Wikipédia


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* les [[composé organique|composés organiques]], et en particulier ceux présentant un haut degré de [[système conjugué|conjugaison]], absorbent aussi dans les régions visible et ultraviolette du [[spectre électromagnétique]]. Les solvants utilisés pour leur analyse sont par exemple l'eau pour les composés qui y sont solubles, ou l'[[éthanol]] pour les composés organiques hydrophobes (les solvants organiques peuvent avoir une absorption UV significative : tous les solvants ne sont donc pas pertinents pour une spectroscopie UV. L'éthanol absorbe peu à la plupart des longueurs d'ondes). La polarité du solvant ou l'acidité du milieu peuvent affecter le spectre d'absorption d'un composé organique. La tyrosine, par exemple, voit son maximum d'absorption et son coefficient d'extinction molaire croître lorsque le pH passe de 6 à 13 ou lorsque la polarité du solvant diminue ;

* les [[complexe à transfert de charge|complexes à transfert de charge]] donnent aussi des solutions colorées, mais ces couleurs sont parfois trop intenses pour être utilisées pour des mesures quantitatives, à moins de diluer les solutions.

La [[loi de Beer-Lambert]] indique que l'absorbance d'une solution à une longueur d'onde donnée est proportionnelle à sa concentration et àla distance parcouru par la longueurlumière dedans l'échantilloncelle-ci. La spectroscopie UV-visible peut donc être utilisée pour déterminer cette concentration. Cette détermination se fait dans la pratique soit à partir d'une [[courbe d'étalonnage]] qui donne l'absorbance en fonction de la concentration, soit quand le [[coefficient d'extinction molaire|coefficients d'extinction molaire]] est connu.

Un [[spectrophotomètre]] UV-visible peut être utilisé comme détecteur pour une [[Chromatographie en phase liquide à haute performance|HPLC]]. La présence d'un analyte donne une réponse que l'on peut supposer proportionnelle à la concentration. Pour des résultats précis, la réponse de l'instrument à l'analyte dans la solution inconnue doit être comparée à un étalon : c'est assez similaire à l'utilisation de courbes d'étalonnage. La réponse (la hauteur de pic) pour une concentration donnée est connue sous le nom de [[facteur de réponse]].